Menu

Technieken

FISH (Techniek 2)

  • = fluorescentie in situ hybridisatie
  • deletie kan groot/klein zijn  soms zichtbaar
  • zichtbaar maken = FISH = stukken op chromosoom kleuren (
    reagentia om 1 bepaald stukje te fluoresceren)
  • DNA = enkelstrengig -> 3 miljard nucleotiden -> om de 3000 nucl. nieuw DNA
  • DNA pt en DNA controle met DNA op glaasje laten reageren -> kleuren + opwarmen (DNA ook
    enkelstrengig maken)
  • alles afkoelen en hybridiseren tot dubbelstrengig DNA (telkens complementen maken tss glas
    & patiënt en tss glas & controlegroep)
    vb. patiënt deletie chr. 1 -> meer op chr. 1 dan
  • 1miljoen druppeltjes gescand -> welke kleur meest gehybr.? -> fout detecteren
  • fout gevonden? -> interfase FISH: enkel kern + # stipjes kleuren en tellen

ARRAY-CGH (Techniek 3)

  1. Array-comparatieve genoom hybridisatie
  2. Array: rooster op draagplaatje
  3. Comparatief: vergelijken controlegroep en patiënt
  4. Genoom: ganse genoom gelabeld (gekleurd)
  5. Hybridisatie: enkelstrengig -> dubbelstrengig

Gevoeligheid/nauwkeurigheid:

  • 1 miljoen druppels DNA (3miljard nucleotiden)
  • 3000 nucl./puntje DNA
  • - 100000 druppels DNA -> hier moeten > nucl. weg zijn om -> te merken
  • 30000nucl./puntje DNA
    Stuvia.com - De Marktplaats voor het Kopen en Verkopen van je Studiemateriaal
  • leest geen genetische code af -> fouten in genetische code niet te zien. vb. gebalanceerde translocatie niet zien, alles is er, maar op foute plaats
Lees meer...

Chromosomale afwijkingen

  • Op #: deletie (stukje chromosoom ontbreekt) vs. duplicatie (stukje chromosoom dubbel)
  • Op vorm: ringchromosoom (uiteindes breken af en groeien toe
  • Op structuur: translocatie
    • Reciprook gebalanceerd: ene geeft stuk aan andere eo.,
      maar alles aanwezig
      vb. chr. 2: breuk in korte arm – chr. 5: breuk in lange arm
    • Robertsoniaanse translocatie: 2 chromosomen met
      acrocentrische centromeren
    • breuken thv. centromeren
      = ongebalanceerd, want ‘antennes’ gaan verloren
      vb. chr. 14 en chr. 21
Lees meer...

Karyotype

  • = volledige kaart van chromosomen
  • Hoe maken?  eerst bloedafname (Techniek 1)
  • WBC:

- B-lymfocyten: aanmaak van antistoffen
- T-lymfocyten: afstotingsverschijnselen

  • PHA toevoegen = simulator voor celdeling (vooral voor T)
  • Veel WBC aangemaakt?
  • Colchicine toevoegen: breekt spoeldraden af
  • H2O toevoegen  cellen worden groter + gespannen
  • laten vallen op draagglaasje
  • cellen barsten open en chromosomen liggen los op glaasje
  • chromosomen fixeren + kleuren om te ordenen met PC
Lees meer...

Chromosoomstructuur

  • Chromosoom : 23 paar -> 48 chromosomen -> 800-1500 genen/chromosoom -> 25000 genen
  • Structuur tijdens metafase mitotische deling (-> dubbele structuur, dan al verdubbeld)
  • Centromeer : overal op zelfde plaats -> meta-, submeta- en acrocentrisch
  • Mitochondriën : circulair DNA -> circulair chromosomen (-> 16500 nucleotiden)
  • Geslachtschromosomen = 23e paar: veel meer nucleotiden, slechts 1 kern -> 1 set chromosomen,
    maar meerdere mitochondriën mogelijk (mito.DNA aanwezig in cel, niet in chromosoom)
  • Chromosoom bevat één lang DNA-molecule
  • Dubbele helix windt rondom complexen histoneiwitten (-> nucleosomen)
  • lusstructuur goed voor DNA-replicatie op chromosoomniveau
  • Banderingspatroon zien? -> kleuren: hard gekleurd = hard opgerold
    banderingstechnieken: # banden op chromosomen ~ streepjescode
Lees meer...
Abonneren op deze RSS feed

Advies nodig?

Vraag dan nu een gratis en vrijblijvende scan aan voor uw website.
Wij voeren een uitgebreide scan en stellen een SEO-rapport op met aanbevelingen
voor het verbeteren van de vindbaarheid en de conversie van uw website.

Scan aanvragen